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國立中興大學技術移轉遴選廠商公告:分生所劉宏仁教授「鑲嵌蛋白pir1呈現脂肪酶於酵母菌細胞壁表面及高度表現脂肪酶之酵母菌株」

更新時間:2022-04-11 12:12:24 / 張貼時間:2022-04-11 12:11:39
林孜燕
單位產學研鏈結中心
202
國立中興大學技術授權遴選廠商公告資料表
公告主旨:國立中興大學技術移轉遴選廠商公告 公告日期: 111年4月11日
公告編號:111-010
內容:國立中興大學技術移轉遴選廠商公告
一、技術名稱:鑲嵌蛋白pir1呈現脂肪酶於酵母菌細胞壁表面及高度表現脂肪酶之酵母菌株
二、技術來源:教育部
三、技術內容:
   脂肪酶 (lipase) 是普遍存在於生物界之一種酵素,包括微生物、植物及動物界。藉由飼料中添加適量微生物亦能提升其它受質之消化及吸收。目前市售酵素多以大腸桿菌表現系統進行量產,而該系統容易產生包含體,導致未 正確摺疊之酵素不具活性,且需純化去除大腸桿菌產生之內毒素。為增加仔豬對飼料營養成分之吸收,防止因抗營養因子消化不良所引起之下痢,透過飼料添加酵素可改善此現象。本研究研發酵母菌表面呈現系統 (yeast surface-displayed system)將酵素經由酵母細胞壁鑲嵌蛋白 pir1 呈現於酵母菌表面,因此酵母菌表現之酵素可直接添加於飼料。結合先前研發之低濃度 0.005% 葡萄糖誘導啟動子 (GTH1 promoter),改善傳統嗜甲醇巴斯德畢赤酵母菌 (Pichia pastoris)需利用昂貴及高危險性之甲醇作為誘導劑之缺點,可減少誘導期間所需碳源及誘導劑,達降低生產成本之目的。此外,為提升脂肪酶之表現量,將目標基因序列優化及建構兩套及四套之多套表面呈現之載體,以提升酵素產量及符合產業化需求。線性質體 DNA 電穿孔於 P. pastoris GS115,以 2000 μg /ml 之高濃度 Zeocin挑選高度同源重組菌株,經 0.005% 葡萄糖誘導 72小時後,以免疫螢光染色法及西方墨點法確認酵素表現。在活性分析結果發現以四套表現載體之轉殖株較單套提升2至4倍之活性,證實套數與酵素活性成正向關係。脂肪酶之生化活性分析結果顯示,兩者之最佳反應溫度分別為 85℃ 及適反應 pH 7.0,而在55℃ 至 85℃ 之熱穩定性及 pH 3.0 至 pH 8.0耐受性處理後,仍具有活性;於腸胃道環境模擬測試,在 0.5% pepsin 及 0.5% trypsin作用後,皆仍維持高活性。因此本研究建立之 P. pastoris 表面呈現系統,不僅大幅減少蛋白量產步驟降低生產成本,具產業化價值。
四、計畫執行機關∕系所:分子生物學研究所
    技術發明人:劉宏仁教授
五、廠商資格:
1、廠商業別:生物技術&飼料廠
2、應具備之專門技術:發酵槽及及蛋白技術
3、應有之機具設備:發酵槽
4、其他:無
六、預期利用範圍及產品:酵母菌表面呈現系統將脂肪酶經由酵母細胞壁鑲嵌蛋白 pir1 呈現於酵母菌細胞壁表面,因此酵母菌表現之酵素可直接添加於小豬飼料, 使豬隻毛色較光澤及促進豬之生長及增重。也可應用於家禽。
七、公開方式:
(一)技術資料於網際網路上公開。
網址:國立中興大學首頁http://www.nchu.edu.tw/index1.php
國立中興大學產學研鏈結中心 http://140.120.49.189/about1.php
(二)逕向國立中興大學產學研鏈結中心葉小姐/黃小姐索取相關資料。
九、申請方式:
(一)由網際網路下載申請表格,填妥後逕送至國立中興大學產學研鏈結中心。
(二)亦得逕至中興大學索取技術資料及申請表格,
地點:台中市興大路145號(國農中心大樓2F 234室),
承辦人員:葉小姐/黃小姐  聯絡電話:(04)22851811#21、20 傳真:(04)22851672
e-mail:jmine3388@nchu.edu.tw 、 yenling@nchu.edu.tw
 
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